目的 探讨细胞外调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinases， ERK）信号通路在大鼠内毒素（lipopolysaccharide， LPS）性急性肺损伤（acute lung injury， ALI）中的作用。 方法 120只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为4组（每组30只）：生理盐水组（Saline组）， LPS组， LPS+U0126组（LPS+U组）， 生理盐水+U0126组（Saline+U组）。其中各组又按照不同的时间点被分为1、3、6、12、24 h 5个亚组。参照文献及预实验，LPS组采用腹腔注射LPS 7.5 mg/kg（5 g/L）制作LPS性ALI模型，Saline组注射等体积的生理盐水。LPS＋U组和Saline+U组在注射LPS或生理盐水前30 min，经腹腔注射U0126 5 mg/kg。利用Western blot检测大鼠肺组织中的磷酸化的ERK、高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box 1， HMGB-1），胞核内的核转录因子-κB（nuclear factor-κB， NF-κB）p65的表达。同时检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid， BALF）中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor， TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase， iNOS）和白介素（interleukin， IL）-10的浓度，肺脏水含量以及肺组织病理学的变化。 结果 注射LPS后， 大鼠肺组织中磷酸化的ERK、HMGB?蛳1明显增多，同时核内NF?蛳κBp65的表达在3 h和12 h明显升高。BALF中的TNF-α、iNOS和 IL-10的浓度也随之升高，肺水含量上升，组织病理学检查显示：肺组织出现明显的病理损害。使用U0126能明显抑制ERK的磷酸化、NF-κB的活化及HMGB-1的表达，肺水含量下降［（4.59±0.51） vs （5.19±0.10）， P<0.05）］，BALF中TNF-α、iNOS和 IL-10的浓度显著降低［TNF-α，3 h达高峰，（28±3） vs （70±10）， P<0.05； iNOS，12 h达高峰，（7 771±957） vs （10 679±1 641）， P<0.05； IL-10，6 h达高峰，（59±10） vs （91±11）， P<0.05］， 同时肺组织的病理损害也明显减轻。 结论 LPS性ALI过程中ERK活化，其抑制剂U0126能减轻LPS性ALI程度；ERK-NF-κB信号通路参与调控炎性因子的释放。
Objective To investigate the role of extracellular signal-regulated kinases（ERK） signal pathway in the lipopolysaccharide（LPS）-induced acute lung injury（ALI） in rats. Methods One hundred and twenty male SD rats were randomly divided into four groups（n=30）： Saline group， LPS group， LSP+U group and Saline+U group. Each group was divided into five subgroups at 1， 3， 6， 12 h and 24 h time point respectively. Western blot was used to detect the expression of phosphorylation of ERK1/2 and high-mobility group box 1（HMGB-1） in lung tissues， nuclear factor-κB（NF-κB）p65 in the nuclear extracts， which reflected the extent of lung injury. Additionally we examined the concentration of tumor necrosis factor（TNF）-α， interleukin（IL）-10 and inducible nitric oxide synthase（iNOS） in bronchoalveolar lavage fluid（BALF）， the lung water content and the histopathologic changes of lung. In addition， survival rate was investigated between LPS group and LSP+U group，and each group with other 10 rats. Results With the administration of LPS， the phospho?蛳ERK1/2 substantially increased immediately and subsequently the expression of NF?蛳κB in the nuclear extracts was increased significantly and reached its peak level at 3 h and 12 h. Moreover， HMGB-1， one of the key mediators in the development of sepsis increased significantly after LPS administration. The concentrations of TNF?蛳α，iNOS and IL-10 were also increased. Pathological examination showed that the normal structure of lung was destroyed badly after LPS injection. U0126 effectively inhibited the activation of ERK1/2， blocked LPS-induced NF-κB activation and HMGB-1 expression in lung tissue， reduced the lung water content［（4.59±0.51） vs （5.19±0.10）， P<0.05］， the concentration of TNF-α， iNOS and IL-10［TNF-α， reached a peak at 3 h，（28±3） vs （70±10）（P<0.05）. iNOS， reached a peak at 12 h， （7 771±957） vs （10 679±1 641），P<0.05. IL-10，reached a peak at 6 h，（59±10） vs（91±11）， P<0.05］， and prevented LPS-induced lung injury. Conclusions ERK1/2 plays an important role in the development of LPS-induced ALI， and the activation of ERK1/2 may be one of the mechanisms of LPS-induced ALI.
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