目的 探讨磷脂酰肌醇‑3‑激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide‑3‑kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路在微RNA(microRNA, miR)‑27a调控大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)中的作用机制,并进一步明确miR‑27a对大鼠心肌产生的影响是否与抑制氧化应激反应相关。 方法 清洁级雄性SD大鼠,体重220~280 g,8~10周龄,96只大鼠按随机数字表分为6组(每组16只):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(IR组)、腺相关病毒(adeno‑associated virus, AAV)空白对照+IR组(AVV‑NC组)、过表达miR‑27a+IR组(AAV‑miR‑27a组)、低表达miR‑27a+IR组(AAV‑miR‑27a‑antago组)、低表达miR‑27a+IR+PI3K抑制剂组(LY组)。AAV⁃miR⁃27a组于造模前14 d尾静脉注射AAV⁃miR⁃27a进行过表达干预,AAV⁃miR⁃27a⁃antago组与LY组造模前14 d尾静脉注射AAV⁃miR⁃27a⁃antago进行低表达干预。结扎大鼠冠状动脉左前降支(left anterior descending, LAD)30 min再灌注120 min制备MIRI模型。LY组于造模前30 min腹腔注射PI3K抑制剂LY294002(1.5 mg/kg)。再灌注120 min后,取血样,采用ELISA法检测各组大鼠血清中肌钙蛋白T(cardiac troponin T, cTnT)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB, CK‑MB)的浓度;比色法检测血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性;处死大鼠,摘取心脏切片进行H‑E染色观察心肌组织病理学变化,伊文蓝‑2,3,5‑氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5‑triphenyl tetrazolium chloride, TTC)法检测大鼠心肌梗死面积;比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平;采用Western blot法测定心肌组织PI3K、Akt及磷酸化(phospho, p)‑PI3K、p‑Akt的蛋白水平。 结果 与Sham组比较:IR组心肌梗死面积百分比增加(P<0.05);血清cTnT、CK‑MB浓度及LDH活性增加(P<0.05);心肌组织MDA水平增加,SOD、GSH水平降低,p‑PI3K、p‑Akt表达上调(P<0.05)。与IR组比较:AAV‑miR‑27a组心肌梗死面积百分比增加(P<0.05);血清cTnT、CK‑MB浓度及LDH活性增加(P<0.05);心肌组织MDA水平增加,SOD、GSH水平降低,p‑PI3K、p‑Akt表达下调(P<0.05)。与IR组比较:AAV‑miR‑27a‑antago组心肌梗死面积百分比降低(P<0.05);血清cTnT、CK‑MB浓度及LDH活性降低(P<0.05);心肌组织MDA水平降低,SOD、GSH水平增加,p‑PI3K、p‑Akt表达上调(P<0.05)。与AAV‑miR‑27a‑antago组比较:LY组心肌梗死面积百分比增加(P<0.05);血清cTnT、CK‑MB浓度及LDH活性增加(P<0.05);心肌组织MDA水平增加,SOD、GSH水平降低,p‑PI3K、p‑Akt表达下调(P<0.05)。 结论 下调miR‑27a表达可能通过激活PI3K/Akt信号通路以及抑制氧化应激反应减轻大鼠MIRI。