目的 评估O‑N‑乙酰葡糖胺(O‑N‑acetyl‑glucosamine, O‑GlcNAc)糖基化修饰转移酶(O‑GlcNAc transferase, OGT)介导的受体相互作用蛋白(receptor interacting protein kinase, RIPK)3糖基化在七氟醚后处理减轻离体大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)损伤中的作用。 方法 取Langendorff离体灌注模型制备成功的大鼠心脏45个,采用随机数字表法分为5组(每组9个):假手术组(SHAM组)、IR组、七氟醚后处理组(SPC组)、SPC+溶剂组[SPC+二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)组]和SPC+OGT抑制剂组(SPC+OSMI‑1组)。建模完成后各组均平稳30 min,之后SHAM组给予K‑H液持续灌注150 min,其余各组大鼠心脏均经历停止灌注30 min后恢复灌注2 h的过程;SPC组、SPC+DMSO组和SPC+OSMI‑1组均于再灌注初给予含2.4%七氟醚的K‑H液持续灌注15 min;此外,在术前准备的K‑H液中,SPC+DMSO组给予50 μmol/L DMSO,SPC+OSMI‑1组给予50 μmol/L OSMI‑1。连续监测各组大鼠缺血前即刻(T0)、再灌注30 min(T1)、再灌注60 min(T2)、再灌注90 min(T3)、再灌注2 h(T4)的左室峰压(left ventricular peak pressure, LVSP)、左室舒张末压(left ventricular end‑diastolic pressure, LVEDP)、心率、左室压力升高最大速率(maximum rate of rise of left ventricular pressure, +dp/dtmax)与左室压力降低最大速率(maximum rate of drop of left ventricular pressure,−dp/dtmax);在再灌注末,采用1%氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride, TTC)染色检测各组大鼠心肌梗死范围;采用ELISA法检测各组大鼠冠状动脉漏出液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)浓度;Western blot法检测各组大鼠心脏O‑GlcNAc、OGT、O‑糖基化糖苷酶(O‑GlcNAcase, OGA)、磷酸化受体相互作用蛋白1(phosphorylated RIPK1, p‑RIPK1)、磷酸化RIPK3(phosphorylated RIPK3, p‑RIPK3)和磷酸化混合系激酶结构域样蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain‑like protein, p‑MLKL)蛋白水平。 结果 与T0比较,IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI‑1组T1~T4时心率、LVSP、+dp/dtmax、−dp/dtmax降低(P<0.05),LVEDP升高(P<0.05);与SHAM组比较,IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI‑1组T1~T4时心率、LVSP、+dp/dtmax、−dp/dtmax降低(P<0.05),LVEDP升高(P<0.05);与IR组比较,SPC组和SPC+DMSO组T1~T4时心率、LVSP、+dp/dtmax、−dp/dtmax升高(P<0.05),LVEDP降低(P<0.05)。与SHAM组比较:IR组、SPC组、SPC+DMSO组、SPC+OSMI‑1组心肌梗死范围和LDH浓度增加(P<0.05),OGT和OGA蛋白水平升高(P<0.05),p‑RIPK1蛋白水平升高(P<0.05);IR组、SPC组、SPC+DMSO组O‑GlcNAc蛋白水平升高(P<0.05);IR组、SPC+OSMI‑1组p‑RIPK3、p‑MLKL蛋白水平升高(P<0.05)。与IR组比较,SPC组、SPC+DMSO组心肌梗死范围和LDH浓度减少(P<0.05),O‑GlcNAc、OGT蛋白水平升高(P<0.05),p‑RIPK3、p‑MLKL蛋白水平降低(P<0.05)。与SPC组比较,SPC+OSMI‑1组心肌梗死范围和LDH浓度增加(P<0.05),O‑GlcNAc、OGT蛋白水平降低(P<0.05),p‑RIPK3、p‑MLKL蛋白水平升高(P<0.05)。 结论 七氟醚后处理可降低离体大鼠心肌IR损伤,其机制与激活OGT介导的RIPK3糖基化有关。